Analyse mutationnelle du gène JAK2 V617F et son association potentielle à la translocation BCR-ABL dans la leucémie myéloïde chronique

Abstract

RESUME : LMC est une hémopathie clonale maligne de cellules souches pluripotente hématopoïétiques, caractérisée par la prolifération prédominante de la lignée granulocytaire dans le sang périphérique et marqué l’hyperplasie myéloïde dans la moelle osseuse. Le chromosome Philadelphie est l’anomalie chromosomique la plus importante qui a été décrite dans la LMC. Cette translocation a été caractérisée, au niveau moléculaire, par les transcrits de fusion générés par les différents types de configurations du gène hybride BCR-ABL. Ces transcrits de fusion sont analysés par PCR à partir de l’ARNm après une étape de transcription inverse (RT-PCR). Il y a un nombre croissant de cas de patients atteints de LMC, qui ont développés la mutation JAK2 V617F, une mutation ponctuelle acquise au sein du gène JAK2, au cours de l'évolution de la maladie. Dans notre étude, nous avons entrepris l’optimisation et la validation des techniques de RT-PCR et PCR-RFLP, afin d’améliorer le diagnostic, faciliter ainsi le suivi de la maladie et, par conséquent, diriger la thérapeutique. Aussi, de rechercher d’éventuelle coexistence de la mutation JAK2 V617F et la translocation BCR- ABL chez ces patients. Nos résultats ont permis de mettre en évidence les différents types de transcrits BCR-ABL au sein d’une population Algérienne, atteints de LMC en phase chronique, qui sont les transcrits b3a2 et b2a2, et nous avons constaté que le transcrit b3a2 est plus fréquent que le transcrit b2a2 et l’absence du transcrit e1a2. Cependant, vu le nombre restreint d’échantillons de LMC considéré dans cette étude, les résultats obtenus n’ont pas permis d’en tirer des conclusions sur la concomitance des deux anomalies génétiques, JAK2 V617F et BCR- ABL, chez un patient atteint de LMC. ABSTRACT :

CML is a malignant clonal disorder of hematopoietic stem cells that results in increases in not only myeloid cells but also erythroid cells and platelets in peripheral blood and marked myeloid hyperplasia in the bone marrow. Philadelphia chromosome is the most important chromosomal abnormality has been described in CML. This translocation was characterized at the molecular level fusion transcripts generated by the different types of configuration of BCR-ABL hybrid gene. These fusion transcripts were analyzed by PCR from mRNA after the step of RT-PCR. There are number of cases increasing of Ph-positive CML with concomitant JAK2 V617F mutation have been reported in the literature, their coexistence appearing during the evolution of the disease. In our study, we undertook the optimization and validation techniques RT-PCR and PCR-RFLP to improve the diagnosis and to facilitate the monitoring of the disease and, therefore, direct therapeutic. Also, our study aimed to find a potential coexistence of the JAK2 V617F mutation and BCR-ABL translocation in a patient. Our results allow identifying the different types of BCR-ABL in an Algerian population, CML in chronic phase, that are b3a2 and b2a2 transcripts which found b3a2 transcript is more frequent than b2a2 transcript, and the e1a2 transcript is absence. However, given the limited number of samples of CML considered in this study did not allow drawing conclusions about the concomitance of two genetic abnormalities, BCR-ABL and JAK2 V617F in a patient with CML.